ਮੌਨਕੀਪੌਕਸ ਵਾਇਰਸ ਰੀਅਲ ਟਾਈਮ ਪੀਸੀਆਰ ਕਿੱਟ
ਉਤਪਾਦ ਵੇਰਵੇ
ਨਿਯਤ ਵਰਤੋਂ
ਇਹ ਰੀਅਲ ਟਾਈਮ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਣਾਲੀਆਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਮਨੁੱਖੀ ਸੀਰਮ ਜਾਂ ਜਖਮ ਐਕਸਯੂਡੇਟ ਨਮੂਨਿਆਂ ਵਿੱਚ ਮੌਨਕੀਪੌਕਸ ਵਾਇਰਸ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਉਣ ਲਈ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।
ਟੈਸਟ ਦਾ ਸਿਧਾਂਤ
ਇਹ ਉਤਪਾਦ ਇੱਕ ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਪੜਤਾਲ-ਅਧਾਰਿਤ Taqman® ਰੀਅਲ-ਟਾਈਮ PCR ਅਸੇ ਸਿਸਟਮ ਹੈ।ਮੌਨਕੀਪੌਕਸ ਵਾਇਰਸ ਦੇ F3L ਜੀਨ ਦੀ ਖੋਜ ਲਈ ਖਾਸ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਅਤੇ ਪੜਤਾਲਾਂ ਤਿਆਰ ਕੀਤੀਆਂ ਗਈਆਂ ਹਨ।ਮਨੁੱਖੀ ਸੁਰੱਖਿਅਤ ਜੀਨ ਨੂੰ ਨਿਸ਼ਾਨਾ ਬਣਾਉਣ ਵਾਲਾ ਅੰਦਰੂਨੀ ਨਿਯੰਤਰਣ ਝੂਠੇ-ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਨਤੀਜਿਆਂ ਤੋਂ ਬਚਣ ਲਈ ਨਮੂਨਾ ਇਕੱਠਾ ਕਰਨ, ਨਮੂਨਾ ਸੰਭਾਲਣ ਅਤੇ ਅਸਲ-ਸਮੇਂ ਦੀ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦੀ ਨਿਗਰਾਨੀ ਕਰਦਾ ਹੈ।ਕਿੱਟ ਇੱਕ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਪ੍ਰੀਮਿਕਸ ਲਾਇਓਫਿਲਾਈਜ਼ਡ ਸਿਸਟਮ ਹੈ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਮੌਨਕੀਪੌਕਸ ਵਾਇਰਸ ਦੀ ਖੋਜ ਲਈ ਲੋੜੀਂਦੀ ਸਮੱਗਰੀ ਸ਼ਾਮਲ ਹੈ: ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਐਂਪਲੀਫੀਕੇਸ਼ਨ ਐਂਜ਼ਾਈਮ, ਯੂਡੀਜੀ ਐਂਜ਼ਾਈਮ, ਪ੍ਰਤੀਕਰਮ ਬਫਰ, ਖਾਸ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਅਤੇ ਜਾਂਚ।
ਮੁੱਖ ਸਮੱਗਰੀ
ਪ੍ਰਦਾਨ ਕੀਤੇ ਗਏ ਭਾਗਾਂ ਨੂੰ ਸਾਰਣੀ ਵਿੱਚ ਸੂਚੀਬੱਧ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ।
| ਕੰਪੋਨੈਂਟਸ | ਪੈਕੇਜ | ਸਮੱਗਰੀ |
| Monkeypox ਵਾਇਰਸਲਾਇਓਫਿਲਾਈਜ਼ਡ ਪ੍ਰੀਮਿਕਸ | 8 ਸਟ੍ਰਿਪ ਪੀਸੀਆਰ ਟਿਊਬਾਂ× 6 ਪਾਊਚ | ਪ੍ਰਾਈਮਰ, ਪੜਤਾਲਾਂ, dNTP/dUTP ਮਿਕਸ, Mg2+, Taq DNA ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼, UDG ਐਨਜ਼ਾਈਮ |
| MPV ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ | 400 μL×1 ਟਿਊਬ | ਟਾਰਗੇਟ ਜੀਨ ਵਾਲੇ ਡੀਐਨਏ ਕ੍ਰਮ |
| MPV ਨੈਗੇਟਿਵ ਕੰਟਰੋਲ | 400 μL×1 ਟਿਊਬ | ਮਨੁੱਖੀ ਜੀਨ ਖੰਡ ਵਾਲੇ ਡੀਐਨਏ ਕ੍ਰਮ |
| ਘੁਲਣ ਵਾਲਾ ਹੱਲ | 1 mL×1 ਟਿਊਬ | ਸਟੈਬੀਲਾਈਜ਼ਰ |
| ਅਨੁਕੂਲਤਾ ਦਾ ਸਰਟੀਫਿਕੇਟ | 1 ਟੁਕੜਾ | / |
ਓਪਰੇਸ਼ਨ ਫਲੋ
1. ਨਮੂਨਾਸੰਗ੍ਰਹਿ:ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਨਿਰਜੀਵ ਟਿਊਬਾਂ ਵਿੱਚ ਇਕੱਤਰ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ
ਮਿਆਰੀ ਤਕਨੀਕੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਦੇ ਨਾਲ.
2. ਰੀਐਜੈਂਟ ਤਿਆਰੀ (ਰੀਏਜੈਂਟ ਤਿਆਰੀ ਖੇਤਰ)
ਕਿੱਟ ਦੇ ਭਾਗਾਂ ਨੂੰ ਬਾਹਰ ਕੱਢੋ, ਸਟੈਂਡਬਾਏ ਵਰਤੋਂ ਲਈ ਉਹਨਾਂ ਨੂੰ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਸੰਤੁਲਿਤ ਕਰੋ।
3. ਨਮੂਨਾ ਪ੍ਰੋਸੈਸਿੰਗ (ਨਮੂਨਾ ਪ੍ਰੋਸੈਸਿੰਗ ਖੇਤਰ)
3.1 ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਕੱਢਣਾ
200μL ਤਰਲ ਨਮੂਨੇ, ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਕੱਢਣ ਲਈ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਅਤੇ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ, ਵਾਇਰਲ ਡੀਐਨਏ ਐਕਸਟਰੈਕਸ਼ਨ ਕਿੱਟਾਂ ਦੀਆਂ ਅਨੁਸਾਰੀ ਜ਼ਰੂਰਤਾਂ ਅਤੇ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆਵਾਂ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਲੈਣ ਦੀ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।
3.2 ਲਿਓਫਿਲਾਈਜ਼ਡ ਪਾਊਡਰ ਘੁਲਣ ਅਤੇ ਟੈਂਪਲੇਟ ਜੋੜਨਾ
ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੀ ਗਿਣਤੀ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਬਾਂਕੀਪੌਕਸ ਵਾਇਰਸ ਲਾਇਓਫਿਲਾਈਜ਼ਡ ਪ੍ਰੀਮਿਕਸ ਤਿਆਰ ਕਰੋ।ਇੱਕ ਨਮੂਨੇ ਲਈ ਇੱਕ ਪੀਸੀਆਰ ਟਿਊਬ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਲਾਇਓਫਿਲਾਈਜ਼ਡ ਪ੍ਰੀਮਿਕਸ ਪਾਊਡਰ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਅਤੇ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਨੂੰ ਦੋ ਨਮੂਨਿਆਂ ਵਜੋਂ ਮੰਨਿਆ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।
(1) ਲਾਇਓਫਿਲਾਈਜ਼ਡ ਪ੍ਰੀਮਿਕਸ ਵਾਲੀ ਹਰੇਕ ਪੀਸੀਆਰ ਟਿਊਬ ਵਿੱਚ 15μL ਘੁਲਣ ਵਾਲਾ ਹੱਲ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ, ਫਿਰ ਹਰੇਕ ਪੀਸੀਆਰ ਟਿਊਬ ਵਿੱਚ ਕ੍ਰਮਵਾਰ 5μL ਕੱਢੇ ਗਏ ਨਮੂਨੇ/ਨੈਗੇਟਿਵ ਕੰਟਰੋਲ/ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ।
(2) ਪੀਸੀਆਰ ਟਿਊਬਾਂ ਨੂੰ ਕੱਸ ਕੇ ਢੱਕੋ, ਪੀਸੀਆਰ ਟਿਊਬਾਂ ਨੂੰ ਹੱਥਾਂ ਨਾਲ ਉਦੋਂ ਤੱਕ ਹਿਲਾਓ ਜਦੋਂ ਤੱਕ ਲਾਇਓਫਿਲਾਈਜ਼ਡ ਪਾਊਡਰ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਘੁਲ ਨਹੀਂ ਜਾਂਦਾ ਅਤੇ ਮਿਲਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਤੁਰੰਤ ਘੱਟ-ਸਪੀਡ ਸੈਂਟਰੀਫਿਊਗੇਸ਼ਨ ਦੁਆਰਾ ਪੀਸੀਆਰ ਟਿਊਬਾਂ ਦੇ ਹੇਠਾਂ ਤਰਲ ਨੂੰ ਇਕੱਠਾ ਕਰੋ।
(3) ਜੇਕਰ ਖੋਜ ਲਈ ਆਮ ਰੀਅਲ-ਟਾਈਮ ਪੀਸੀਆਰ ਯੰਤਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋ, ਤਾਂ ਪੀਸੀਆਰ ਟਿਊਬਾਂ ਨੂੰ ਸਿੱਧੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਖੇਤਰ ਵਿੱਚ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ ਕਰੋ;ਜੇਕਰ ਖੋਜ ਲਈ BTK-8 ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋ, ਤਾਂ ਹੇਠ ਲਿਖੇ ਓਪਰੇਸ਼ਨ ਕਰਨ ਦੀ ਲੋੜ ਹੈ: PCR ਟਿਊਬ ਤੋਂ BTK-8 ਦੇ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਚਿੱਪ ਵਾਲੇ ਖੂਹ ਵਿੱਚ 10 μL ਤਰਲ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ ਕਰੋ।ਇੱਕ ਪੀਸੀਆਰ ਟਿਊਬ ਚਿੱਪ ਉੱਤੇ ਇੱਕ ਖੂਹ ਨਾਲ ਮੇਲ ਖਾਂਦੀ ਹੈ।ਪਾਈਪਟਿੰਗ ਕਾਰਵਾਈ ਦੌਰਾਨ, ਇਹ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਓ ਕਿ ਪਾਈਪੇਟ 90 ਡਿਗਰੀ ਲੰਬਕਾਰੀ ਹੈ।ਐਰੋਸੋਲ ਬੈਰੀਅਰ ਪਾਈਪੇਟ ਟਿਪਸ ਨੂੰ ਖੂਹ ਦੇ ਕੇਂਦਰ ਵਿੱਚ ਮੱਧਮ ਬਲ ਨਾਲ ਰੱਖਿਆ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਜਦੋਂ ਇਹ ਪਹਿਲੇ ਗੇਅਰ ਤੱਕ ਪਹੁੰਚਦਾ ਹੈ (ਬੁਲਬੁਲੇ ਤੋਂ ਬਚਣ ਲਈ) ਤਾਂ ਪਾਈਪੇਟ ਨੂੰ ਧੱਕਣਾ ਬੰਦ ਕਰ ਦੇਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।ਖੂਹਾਂ ਦੇ ਭਰੇ ਜਾਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਸਾਰੇ ਖੂਹਾਂ ਨੂੰ ਢੱਕਣ ਲਈ ਇੱਕ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਚਿਪ ਝਿੱਲੀ ਕੱਢੋ ਅਤੇ ਚਿੱਪ ਨੂੰ ਫਿਰ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਖੋਜ ਖੇਤਰ ਵਿੱਚ ਤਬਦੀਲ ਕਰ ਦਿੱਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।
4. ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫੀਕੇਸ਼ਨ (ਖੋਜ ਖੇਤਰ)
4.1 ਪੀਸੀਆਰ ਟਿਊਬਾਂ/ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਚਿੱਪ ਨੂੰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਟੈਂਕ ਵਿੱਚ ਪਾਓ ਅਤੇ ਹਰੇਕ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦੇ ਨਾਮ ਨੂੰ ਅਨੁਸਾਰੀ ਕ੍ਰਮ ਵਿੱਚ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਸੈੱਟ ਕਰੋ।
4.2 ਖੋਜ ਫਲੋਰਸੈਂਸ ਦੀਆਂ ਸੈਟਿੰਗਾਂ: (1) ਮੌਨਕੀਪੌਕਸ ਵਾਇਰਸ (FAM);(2) ਅੰਦਰੂਨੀ ਨਿਯੰਤਰਣ (CY5)।
4.3 ਹੇਠਾਂ ਦਿੱਤੇ ਸਾਈਕਲਿੰਗ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ ਨੂੰ ਚਲਾਓ
ABI7500, Bio-Rad CFX96, SLAN-96S, QuantStudio ਦਾ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ:
| ਕਦਮ | ਤਾਪਮਾਨ | ਸਮਾਂ | ਸਾਈਕਲ | |
| 1 | ਪ੍ਰੀ-ਡੈਨਚਰੇਸ਼ਨ | 95℃ | 2 ਮਿੰਟ | 1 |
| 2 | ਵਿਕਾਰ | 95℃ | 10 ਐੱਸ | 45 |
| ਐਨੀਲਿੰਗ, ਐਕਸਟੈਂਸ਼ਨ, ਫਲੋਰਸੈਂਸ ਐਕਵਾਇਰ | 60℃ | 30 ਐੱਸ | ||
BTK-8 ਦਾ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ:
| ਕਦਮ | ਤਾਪਮਾਨ | ਸਮਾਂ | ਸਾਈਕਲ | |
| 1 | ਪ੍ਰੀ-ਡੈਨਚਰੇਸ਼ਨ | 95℃ | 2 ਮਿੰਟ | 1 |
| 2 | ਵਿਕਾਰ | 95℃ | 5 ਐੱਸ | 45 |
| ਐਨੀਲਿੰਗ, ਐਕਸਟੈਂਸ਼ਨ, ਫਲੋਰਸੈਂਸ ਐਕਵਾਇਰ | 60℃ | 14 ਐੱਸ | ||
5. ਨਤੀਜਿਆਂ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ (ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ਇੰਸਟਰੂਮੈਂਟ ਯੂਜ਼ਰ ਮੈਨੂਅਲ ਵੇਖੋ)
ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਨਤੀਜੇ ਆਪਣੇ ਆਪ ਸੁਰੱਖਿਅਤ ਹੋ ਜਾਣਗੇ।ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕਰਨ ਲਈ "ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ" 'ਤੇ ਕਲਿੱਕ ਕਰੋ, ਅਤੇ ਸਾਧਨ ਆਪਣੇ ਆਪ ਨਤੀਜਾ ਕਾਲਮ ਵਿੱਚ ਹਰੇਕ ਨਮੂਨੇ ਦੇ Ct ਮੁੱਲਾਂ ਦੀ ਵਿਆਖਿਆ ਕਰੇਗਾ।ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਅਤੇ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਨਤੀਜੇ ਹੇਠਾਂ ਦਿੱਤੇ "6. ਗੁਣਵੱਤਾ ਨਿਯੰਤਰਣ" ਦੇ ਅਨੁਕੂਲ ਹੋਣਗੇ।
6. ਗੁਣਵੱਤਾ ਕੰਟਰੋਲ
6.1 ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ: FAM ਚੈਨਲ ਵਿੱਚ ਕੋਈ Ct ਜਾਂ Ct>40 ਨਹੀਂ, CY5 ਚੈਨਲ ਵਿੱਚ Ct≤40 ਸਧਾਰਨ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਕਰਵ ਨਾਲ।
6.2 ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ: ਆਮ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਕਰਵ ਦੇ ਨਾਲ FAM ਚੈਨਲ ਵਿੱਚ Ct≤35, CY5 ਚੈਨਲ ਵਿੱਚ ਸਧਾਰਨ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਕਰਵ ਦੇ ਨਾਲ Ct≤40।
6.3 ਨਤੀਜਾ ਵੈਧ ਹੁੰਦਾ ਹੈ ਜੇਕਰ ਉਪਰੋਕਤ ਸਾਰੇ ਮਾਪਦੰਡ ਪੂਰੇ ਹੁੰਦੇ ਹਨ।ਨਹੀਂ ਤਾਂ, ਨਤੀਜਾ ਅਵੈਧ ਹੈ।
ਨਤੀਜੇ ਦੀ ਵਿਆਖਿਆ
ਹੇਠ ਦਿੱਤੇ ਨਤੀਜੇ ਸੰਭਵ ਹਨ:
| FAM ਚੈਨਲ ਦਾ Ct ਮੁੱਲ | CY5 ਚੈਨਲ ਦਾ Ct ਮੁੱਲ | ਵਿਆਖਿਆ | |
| 1# | ਕੋਈ ਸੀਟੀ ਜਾਂ ਸੀਟੀ> 40 ਨਹੀਂ | ≤40 | Monkeypox ਵਾਇਰਸ ਨਕਾਰਾਤਮਕ |
| 2# | ≤40 | ਕੋਈ ਵੀ ਨਤੀਜੇ | Monkeypox ਵਾਇਰਸ ਸਕਾਰਾਤਮਕ |
| 3# | 40-45 | ≤40 | ਦੁਬਾਰਾ ਟੈਸਟ;ਜੇਕਰ ਇਹ ਅਜੇ ਵੀ 40~45 ਹੈ, ਤਾਂ 1# ਵਜੋਂ ਰਿਪੋਰਟ ਕਰੋ |
| 4# | ਕੋਈ ਸੀਟੀ ਜਾਂ ਸੀਟੀ> 40 ਨਹੀਂ | ਕੋਈ ਸੀਟੀ ਜਾਂ ਸੀਟੀ> 40 ਨਹੀਂ | ਅਵੈਧ |
ਨੋਟ ਕਰੋ: ਜੇਕਰ ਅਵੈਧ ਨਤੀਜਾ ਆਉਂਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ ਇਕੱਠਾ ਕਰਨ ਅਤੇ ਦੁਬਾਰਾ ਜਾਂਚ ਕਰਨ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।
ਆਰਡਰ ਜਾਣਕਾਰੀ
| ਉਤਪਾਦ ਦਾ ਨਾਮ | ਬਿੱਲੀ.ਨੰ | ਆਕਾਰ | ਨਮੂਨਾ | ਸ਼ੈਲਫ ਲਾਈਫ | ਟ੍ਰਾਂਸ.& Sto.ਟੈਂਪ |
| ਮੌਨਕੀਪੌਕਸ ਵਾਇਰਸ ਰੀਅਲ ਟਾਈਮ ਪੀਸੀਆਰ ਕਿੱਟ | B001P-01 | 48 ਟੈਸਟ/ਕਿੱਟ | ਸੀਰਮ / ਜਖਮ ਐਕਸਯੂਡੇਟ | 12 ਮਹੀਨੇ | -25～-15℃ |
